在免疫積淀IP&免疫熒光IF若何精確的挑選Flag標簽抗體?

　　Flag標簽體系是已被公認的用于抒發、純化和檢測融會卵白的抒發體系，普遍利用于Western blotting、免疫細胞組化、免疫共積淀、流式細胞術、卵白純化和卵白彼此感化、卵白分手等多個研討范疇。Flag標簽是一個與重組卵白相融會的由8個親水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)構成的多肽片段。FLAG標簽只要8個氨基酸構成，是以它不會占有其余表位與連系域，防止致使融會卵白的功效、排泄性和轉運產生轉變。由于它的親水性特色，FLAG標簽偏向于定位在融會卵白外表，是以更容易與抗體連系和被腸激酶酶解。

　　由于Flag標簽可位于卵白質的C端或N端，這一體系已用于各類細胞范例，包含細菌、酵母和哺乳細胞。由于Flag標簽體系的純化前提長短變性的，是以能夠純化一切有活性的融會卵白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#E022060)能夠用于檢測和Flag標簽融會抒發卵白的抒發、細胞內定位，和純化、定性或定量檢測Flag融會抒發卵白等。比方在免疫熒光IF的嘗試里，同時共同EarthOx的Dylight 549熒光二抗，利用該抗體能夠精確的定位出Flag融會抒發卵白在細胞內的地位(如圖白色顯現局部)。別的，做融會抒發闡發前，經由過程免疫共積淀手藝取得Flag融會抒發卵白也長短常主要的一步，是以挑選一個適合的、可用于免疫共積淀(Immunoprecipitation，IP)Flag標簽抗體也是很須要的。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#E022060)不只能利用于細胞內定位的IF嘗試，一樣還能利用于IP嘗試。1:200乃至更高的IP嘗試濃縮比率，也說了然該抗體自身的具備很高的效價，同時，由于是單克隆抗體，是以特同性也很高。高效價所對應的高濃縮比率也象征著超高性價比。

　　除下面所說的IP和IF嘗試，Flag標簽抗體的根基利用還包含WB嘗試，EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號#E022060)在該利用中一樣表現優良。申明書的保舉肇端濃縮比例是1:1000，但在如上圖所示的嘗試中，在1:10000的濃縮比率下也表現優良(EarthOx也停止了50000次今后的濃縮，依然顯現出很好的條帶顯現，不在申明書里列出)。是以EarthOx的Flag標簽抗體豈但能經由過程WB嘗試很好的知足融會卵白抒發量的闡發，并且在免疫熒光IF、免疫積淀IP的嘗試中也有很好的表現，能知足Flag標簽融會卵白的細胞內定位和純化的須要，并且其高效價和特同性，遠遠比其余Flag抗體具備更高的性價比