對LC-MS/MS色譜柱人們的慣性思惟凡是是由反相液相色譜柱起頭研發,發生這類慣性思惟是由于慣例高效液相色譜闡發中C18等反相高效液相色譜柱據有統治位置,另外一方面是色譜公司不懂LC-MS/MS闡發誤導用戶的成果。

　　LC-MS/MS闡發的適用計謀和HPLC有很大差別!LC-MS/MS闡發的體例的挑選性最主要!

　　色譜公司不能簡略地將現成的反相液相色譜填料裝成5cmx2.1mm短柱充任LC-MS/MS柱利用,但現實上幾近一切色譜公司都是如許做的。如許的反相液相色譜LC-MS/MS柱有三個較著的缺點:

　　(1)很多極性化合物難以保留，質譜活絡度差。

　　很多主要的物資，如抗癌藥物DTIC,抗痛藥物河豚毒素，凈化物資三聚氰胺,中草藥中糖肽等很是極性,在反相液相色譜柱上不保留。另有很多的化合物比擬極性,利用少許的甲醇或乙腈就從反相液相色譜柱上洗脫。在藥物代謝研討中,察看到很多化合物本身疏水,但代謝產品親水的環境。甲醇或乙腈含量低,離子化水平低,質譜活絡度差。所謂水相C18柱在LC-MS/MS闡發中不代價。

　　(2)用慣例反相色譜填料裝成2.1mm內徑的色譜柱在LC-MS/MS和LC/MS利用中常墮入影象效應(CarryoverEffect)的“圈套”

　　LC-MS/MS和LC/MS利用中另外一個嚴峻題目是影象效應(CarryoverEffect)。影象效應是指在進樣后,再進一針空缺在一樣的保留時候依然察看到化合物峰。影象效應的副感化是較著的:它能夠報酬地增添下一樣本的MRM旌旗燈號,影響定量闡發的精密度和精確度。USFDABioanalyticalRegulatoryGuidances限定最高校準規范(highestcalibrationstandard)的影象效應不能跨越20%最低校準規范(lowestcalibrationstandard)MRM旌旗燈號的20%。

　　由于大局部色譜公司都利用現成的反相液相色譜填料簡略地裝成5cmx2.1mm短柱充任LC-MS/MS柱,在很多環境下，使影象效應強,校準規范曲線規模必須報酬延長,或不得已在進樣后,再進一針乃至兩針空缺最小化影象效應,而后進下一個樣品。一切這些嚴峻地下降了出產效力。

　　(3)峰形拖尾或歪曲

　　由于活性硅醇基沒法完整封鎖,很多堿性化合物在幾近一切色譜公司的反相液相色譜柱下面有較著的峰形拖尾。這類峰形拖尾是影象效應的一個主要的本源。

　　另外一方面，利用不準確體例過度封鎖導致一些酸性和兩性化合物分手結果不佳,出格是呈現峰失真和割裂景象。