一、凈化的斷根

　　培育細胞一經凈化，大都較難處置。若是凈化細胞代價不大，宜棄之;有細胞株保管的或可購買的，可在尋覓緣由后完全消毒操縱室，蘇醒或從頭購買細胞，再培育。若凈化細胞代價較大，又難于從頭獲得，可接納以下方式斷根。

　　(一)利用抗生素

　　抗生素對殺滅細菌較有用。結適用藥比零丁用藥結果好。防備用藥比凈化后再用藥結果好。防備用藥普通用雙抗生素(青霉素100u/mL加鏈霉素100μg/mL)，凈化后斷根用藥需接納大于經常利用量5～10倍的沖刷法，于加藥后感化24～48小時，再換慣例培育液。此法在凈化初期能夠有用。所用抗生素種類除青霉素、鏈霉素外，還可用慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四環素、制霉菌素等。經常利用400～800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四環素處置，每隔2～3日換液1次，傳1～2代停止醫治。最近幾年來有報道，4-氟，2-羥基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四環素衍生物(BM-2)等三種抗生素單用或適用對殺滅支原體有用。這三種抗生素均用PBS配成250X稀釋液，-20℃保管備用，利用濃度Cip為10μg/mL，BM-1為10μg/mL，BM-2為5μg/mL。利用時先吸除凈化的培育液，插手含BM-1的RPMI1640培育液，3天后再吸除培育液，插手含BM-2的RPMI1640培育液，培育4天，如斯持續3個輪次，直至用33258熒光染色鏡檢證實已斷根支原體后，再加普通培育液培育傳代3-4次。

　　(二)加溫處置

　　將凈化的構造培育物放在41℃培育18小時，可殺死支原體，但對細胞有不良影響。以是在處置前要停止預嘗試，試探能最大限制殺死支原體又對細胞影響最小的加熱時候。此法偶然不靠得住。若先用藥物處置后，再以41℃加溫處置結果更佳。

　　(三)利用支原體特同性血清

　　用5%的兔支原體免疫血清(血凝效價1:320以上)可去除支原體凈化，因特異抗體可按捺支原體發展，故經抗血清處置后11天即轉為陽性，并且5個月后仍為陽性。但此法比擬費事，不如用抗生素便利、經濟。

　　(四)其余方式

　　除上述去除凈化的方式外，另有植物體內接種除菌法、巨噬細胞吞噬法、凈化培育瓶中加溴尿嘧啶再用光照射的方式及過濾法等，但均較費事，且結果不肯定。以是一旦支原體凈化，除非有出格主要代價，普通均棄之從頭培育。

　　二、凈化的防備

　　防備是防止細胞培育進程中產生凈化的最好方式。只要防備任務做在前，能力將產生凈化的能夠性降到最小水平。普通防備可從以下幾方面動手：

　　(一)從物品、用品消毒滅菌動手

　　細胞培育所用物品洗濯、消毒要完全，各類溶液滅菌除菌要仔細，并在無菌嘗試陽性后能力利用。操縱室及殘剩的無菌東西要按期潔凈消毒滅菌。

　　(二)從操縱者做起

　　1、操縱者義務心要強，要仔細慎重，操縱手藝要諳練。進無菌室前要用番筧洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘，按劃定穿斷絕衣。進入后關好門，坐下來盡可能少走動。任務起頭要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和炙烤瓶口。事前要嚴酷查抄東西、溶液和培育物，不要把凈化品或未經消毒的物品帶入無菌室內，更不能隨意利用，以防止形成多量凈化。

　　2、操縱者舉措要輕，必須在火焰四周無菌區內翻開瓶口，并將瓶口動彈炙烤。操縱時盡可能不要說話，若打噴嚏或咳嗽應轉向反面。

　　3、操縱時要常改換吸管，切勿一根吸管做到底。一旦發明吸管口打仗了手和其余凈化物品應棄去。嘗試終了實時整理，堅持嘗試室潔凈整潔，最初用消毒水浸泡的紗布擦臺面。

　　(三)防止細胞穿插凈化

　　在停止多種細胞培育操縱時，所用用具要嚴酷區分，最好做上標記便于區分。并按挨次停止操縱，防止一路停止時易產生紊亂。

　　在停止換液或傳代操縱時，打針器和滴管不要涉及細胞培育瓶瓶口，以防止把細胞帶到培育液中凈化其余細胞。

　　一切細胞一旦購買，或從別處引入，或本身成立，均應盡早留種凍存，一旦產生凈化可棄之蘇醒，從頭培育。