引 言
按照收羅經氛圍傳布細菌的經歷（Petras 1966，1967；Rotter和Koller 1974），測試比擬了凝膠過濾器和撞擊采樣器和規范撞擊器（AGI-30型）對病毒氣溶膠停止采樣的有用性。
這些研討有兩大方針：
擬定過濾病毒氣溶膠和處置用于收羅病毒氣溶膠的過濾器的規范體例
測試過濾器是不是適合大容量采樣
 
資料和體例

研討
接(jie)納嘗(chang)(chang)試(shi)(shi)產生的大腸桿菌(jun)噬菌(jun)體靜態氣(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)（在(zai)(zai)(zai)寬濕度(du)規(gui)模內(nei)具備高不變性）、T3大腸桿菌(jun)噬菌(jun)體和(he)A/PR/8/34（H1N1）流(liu)感病(bing)毒。氣(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)是在(zai)(zai)(zai)溫度(du)和(he)絕對濕度(du)可(ke)調(diao)理的50 m3的嘗(chang)(chang)試(shi)(shi)室中(zhong)利用具備導液(ye)器(qi)（粒徑(jing)≤5μm）的放射霧化器(qi)制成的。氣(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)利用裝配在(zai)(zai)(zai)16711收羅器(qi)（Collectron，MD8 airscan氛(fen)(fen)圍采(cai)樣器(qi)之前的型號）架中(zhong)的12602凝膠(jiao)(jiao)過濾膜過濾。在(zai)(zai)(zai)高流(liu)量下，該裝配可(ke)與兩(liang)臺并聯的真空泵交換利用（今朝的Sartorius MD8 airscan氛(fen)(fen)圍采(cai)樣器(qi)專為高流(liu)量設想(xiang)）。

標準化調控法式風格和取樣容積由充分利用于撞擊力力收羅器和AGI-30撞擊力力器的取樣器釣魚任務依據絕對。 途經過程瓊脂籠蓋法（噬斑法）對了解的噬菌體小粒變慢化學發光法檢測法，進行孵育蛋滴定流行性感冒電腦病毒（Mayr等等，1974，1977）或途經過程在出現腹水癌腫生殖細胞繁殖后變慢血吸出考試（Adamczyk等等，1975）。

 
成果

一、經由進程氛圍過濾和過濾器處置對病毒氣溶膠停止取樣的規范法式（T1和流感病毒氣溶膠的成果）
過濾器的0.1-0.4 m/s進口速率不影響過濾器在每升氛圍中的傳染單元（I.U.）產率。是以，當收羅不變性未知的病毒時，倡議采樣時候為1-2min，進口速率為22.5 l/min或0.3 m/s。在此進程中，不受高達85%的絕對濕度影響的過濾器顯現99.9％或更高的高扣留率。
 
經由進程在瓊脂平板上間接培育凝膠過濾器來肯定氛圍傳布細菌數目這一經常利用體例對病毒氣溶膠是不可行。對病毒氣溶膠，較實在可行的體例是將過濾器消融于適合的介質中，而后利用嘗試室振動器將介質充實夾雜以分化任何微生物|病毒堆積。
 
以下(xia)法(fa)式(shi)已證實是有用(yong)的。為了消融過(guo)(guo)濾器(qi)，在(zai)200ml寬頸錐形燒瓶中放入20 ml pH值為7.2的m/15磷(lin)酸鹽緩(huan)沖液和40個(ge)直徑為2.5 mm的玻璃珠(zhu)。將(jiang)燒瓶置于(yu)調理至(zhi)恰當速率的嘗試室振(zhen)動器(qi)上，在(zai)室溫下(xia)動搖溶液5分鐘。緩(huan)沖溶液的體積能(neng)夠或(huo)許削(xue)減到2.5 ml，以便稀釋傳(chuan)染(ran)顆粒。在(zai)此(ci)進程中，過(guo)(guo)濾器(qi)完整消融。

二、利用凝膠過濾器、撞擊收羅器和撞擊器按照規范法式比擬采樣T1和T3氣溶膠
對兩種噬菌體(ti)氣(qi)(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)，3種收(shou)羅體(ti)例的(de)效(xiao)(xiao)力挨(ai)次(ci)為νF>νI-C>νI（圖1），這有(you)(you)益于過(guo)濾器(qi)。這類(lei)差別(bie)產生了(le)其有(you)(you)用性(xing)的(de)比例。對T3氣(qi)(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)，νF：νI-C：νI為4.02：3.76：1，此中過(guo)濾器(qi)和撞擊收(shou)羅器(qi)之間(jian)的(de)差別(bie)不(bu)較著。對T1氣(qi)(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)，比例為2.04：1,44：1（50％絕對濕度）；各值之間(jian)1％的(de)差別(bie)具備主要(yao)意思。在氣(qi)(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)濃度108-105個噬菌體(ti)顆粒(li)/m3氛(fen)圍的(de)規模內確認(ren)了(le)收(shou)羅效(xiao)(xiao)力的(de)挨(ai)次(ci)，這也是(shi)利用規范法式的(de)一切3種收(shou)羅體(ti)例對噬菌體(ti)氣(qi)(qi)溶(rong)膠(jiao)(jiao)的(de)下檢測(ce)限。

圖1  AGI-30沖撞器(I)、凝露過濾清潔器(F)和沖撞收羅器(I–C)間對T1和T3氣溶膠收羅效益的比較。

三、用凝膠膜過濾器大致積取樣病毒氣溶膠
作為檢測低病毒顆粒（病毒粒子）濃度的先決前提，大致積量取樣在實際上能夠或許經由進程以下體例完成：
在特定時候內增添流量
耽誤采(cai)樣時候(hou)

1.耽誤采樣時候（T1和甲型流感病毒的成果）：
經由(you)進程過(guo)濾(lv)器以(yi)0.3 m/s的(de)進口速率(lv)對氛(fen)圍(wei)采樣(yang)15分(fen)鐘（相稱于337.5升采樣(yang)氛(fen)圍(wei)），不會致使收羅的(de)病毒(du)(du)粒子失活。該嘗試(shi)的(de)取(qu)樣(yang)法式經由(you)進程削減緩沖溶液體(ti)積以(yi)取(qu)得更高的(de)病毒(du)(du)粒子|噬菌體(ti)粒子濃度，證實了較低的(de)檢測限能夠或許(xu)低轉換為102 I.U./m3氛(fen)圍(wei)規模(mo)（圖(tu)2）這一數學實際。

圖2  用于產生氣溶膠的每毫升液體中噬菌體顆粒的濃度與利用凝膠過濾器收羅產生的每升氛圍中l.U.的數目之間的干系。在絕對濕度為50-55%和20℃下的T1氣溶膠。
A-E表現收羅前提：
A      規范法式（參見普通信息）
B      取樣時候：  5 min，  溶液體積：20   ml
C      取樣時候：15 min，  溶液體積：20   ml
D      取樣時候：  5 min，  溶液體積：  5   ml
E      取樣時候： 15 min， 溶液體(ti)積：  5   ml  

2.以更高的流速對病毒氣溶膠采樣：
以更高的進口速率（高達1.8 m/s，相稱于135 l/min）和極度情況前提（最高30°C，絕對濕度為90%）在凝膠過濾器上停止的機器應力測試贊助咱們在采樣時代在這些更卑劣的前提下測試病毒氣溶膠的不變性。
 
使人驚奇的是，進口速率能夠或許增添至1.6 m/s，而不會對過濾器的效力產生較著影響。對T1氣溶膠，與用作參考量的規范AGI-30撞擊器比擬，過濾器的產率為140%（圖3）。在進口速率為1.8 m/s時，產率降落至撞擊器的107%。
 
經由(you)進程(cheng)計較氣流(liu)的(de)(de)雷諾數，能夠或許按照(zhao)由(you)氛圍湍(tuan)流(liu)引發的(de)(de)采樣進程(cheng)產生的(de)(de)物流(liu)攪擾(rao)追蹤產率降落的(de)(de)緣由(you)。即(ji)便在15分鐘的(de)(de)采樣時候內，T1大腸桿菌(jun)噬菌(jun)體和甲(jia)型流(liu)感病毒(du)（圖4）都顯現出較高的(de)(de)不變性(xing)。

圖3  在20℃和(he)絕對(dui)濕度為55%的(de)情況下對(dui)T1氣溶膠取樣后(hou)的(de)凝膠過濾器的(de)產率作為過濾器進口速(su)率的(de)函數。

圖4  凝膠過(guo)濾(lv)(lv)器收羅流感病毒氣溶膠的(de)效力作為過(guo)濾(lv)(lv)器進(jin)口速率和(he)采樣時(shi)候(hou)的(de)函(han)數（6次嘗試）。

另外，對T1大腸桿菌噬菌體，已證實，即便在絕對濕度為90％的情況下，過濾器的收羅效力在卑劣的氛圍取樣前提下仍然堅持恒定。值得注重的是，即便在極度應力下，過濾器對T1氣溶膠的扣留才能仍堅持在99.82％的均勻程度。在30℃和80-85％絕對濕度下，在15分鐘的采樣時候內，顛末測試的過濾器最大應力到達1.6 m/s的進口速率。對T1氣溶膠，過濾器的均勻扣留率為99.76%。
 
在這些前提下，過濾器的分歧性、不變性和處置機能產生較著轉變。
 
過濾器的周邊被稀釋水份的液滴潮濕。固然過濾器未粘附到過濾器支架底部且很輕易撤除，但呈現了像橡膠一樣的濃度變更。
 
掃描電(dian)子顯(xian)微照(zhao)片(pian)顯(xian)現，在這些極(ji)度前提下，膜的(de)網狀壁布(bu)局(ju)收縮到其普通直徑(jing)的(de)兩倍或(huo)三倍。可是，過濾器的(de)根基布(bu)局(ju)堅持不變。

 
評價總結

在勝利利用凝膠過濾器收羅經氛圍傳布的細菌以后，此刻也已證實凝膠過濾器合用于收羅病毒氣溶膠。
 
凝膠過濾器可為全部生物氣溶膠（細菌、霉菌和病毒）系列供給靠得住的收羅體例。
 
利用過濾器停止收羅的長處對病毒檢測尤其主要，這些長處包含：
在寬流量/分鐘規模內具備恒定的收羅效力。
即便在溫度和絕對濕度的極度情況前提下，也能堅持過濾器的高扣留才能。
過濾器中的凝膠能起到像掩護性病毒卵白質衣殼一樣的感化，掩護病毒免受外表滅活影響。
利用凝膠過濾法不受病毒濃度影響。
該體例在采樣之前的籌辦進程中和以后的處置和評價時代須要的任務和資料都較少。
收羅(luo)的病(bing)毒粒子能夠或許在差別的細(xi)胞(bao)系上(shang)平行培(pei)育(yu)。

 
利用凝膠膜過濾法收羅
病毒和噬菌體的普通信(xin)息

法式步驟
一、收羅病毒和噬菌體：

帶有凝膠過濾器的MD8 airscan氛圍采樣器，一次性80 mmφ過濾器
* 此處給出的利用數據是利用具備50 mm凝膠過濾器的之前型號16711肯定的
二、處置凝膠膜過濾(lv)器(qi)，將其消(xiao)融并(bing)在溶液中振動：

三、檢測病毒和噬菌體：
四、經由(you)進程貯存利用過濾器(qi)來不變扣留的(de)病毒氣溶(rong)膠，一向貯存至處置(zhi)前(qian)：