嘗試資料    大腸桿菌 
試劑、試劑盒    LB頂層瓊脂糖疊氮鈉第一抗體 
儀器、耗材    硝酸纖維素濾膜 
抗體    CD2抗體 
山羊Lambda Light Chain多克隆抗體 
山羊Complement C4多克隆抗體 

嘗試步驟：     
1. 在150 ml LB平板上滴定λgt11 cDNA文庫的滴度，宿主菌為大腸桿菌LE392菌株，每一個平板利用7 ml 1%LB頂層瓊脂。 
2. 挑選恰當的滴度鋪平板，于37℃溫育8h。 
3. 將直徑132 mm硝酸纖維素濾膜別離編號，放入上述已培育8 h的平板中，于37℃溫育。 
4. 用針頭刺孔并用印度墨汁在每張濾膜上作一標記，而后掏出濾膜。 
5. 在室溫用免疫挑選緩沖液洗膜30 min，以封鎖濾膜并洗去膜上的殘留細菌，頻頻洗濯2~4次。 
6. 將第一抗體（濃縮于免疫挑選緩沖液中，終濃度為0.5~10 μg/ml）加到裝有濾膜的塑料袋中，熱封口后置40℃程度搖床上反映2~24h。 
7.  于4℃用免疫挑選緩沖液洗膜4~5次，毎次5~10min。 
8.  接著將125I 標記的第二抗體（0.5×106cpm/ml）插手裝有濾膜的熱封塑料袋中，4℃反映2~6 h。 
9.  在4℃用免疫挑選緩沖液洗膜4~5次，而后用濾紙將濾膜上的液體吸干。 
10.  用塑料保鮮膜包裹好濾膜，利用增感屏在-70℃對X光片暴光。 
11.  經由過程頻頻濃縮，純化λ噬菌體cDNA融會卵白克隆，終究取得單一的陽性克隆。 
12.  培育陽性克隆，制備重組λ噬菌體DNA。 

IPTG法 
再試一次具體方法原因：用抗體挑選λgt11 cDNA文庫時，可待噬斑長到必然裎度方可引誘抒發融會卵白，挑選到陽性克隆的勝利幾率就能夠大大增添。噬菌體發展3~4 h后，將含引誘劑IPTG的濾膜放入噬斑平板，便可引誘β-半乳糖苷酶-cDNA融會卵白的抒發，持續在37℃培育，而后按根基計劃用抗體對影印濾膜停止挑選。 

嘗試資料    大腸桿菌 
試劑、試劑盒    IPTG 
儀器、耗材    培育箱牙簽硝酸纖維素膜 
抗體    CD2抗體 
山羊Lambda Light Chain多克隆抗體 
山羊Complement C4多克隆抗體 

嘗試步驟     
1.  用1×104~5×104融會有cDNA的λ噬菌體傳染0.5~1.0 ml 培育的Y1090新穎菌懸液。 
2.  插手預熱到47℃的7 ml 頂層瓊脂中，鋪150 mm LB平板，42℃培育3.5 h。 
3.  將132 mm 直徑的硝酸纖維素濾膜故入10 mmol/l IPTG溶液中浸泡后，掏出枯燥。 
4.  再將含IPTG的濾膜放入噬菌體文庫平板中，37℃培育3.5 h。 
5.  每張濾膜作好標記后掏出，封鎖濾膜上的殘剩的卵白連系位點并停止雜交檢測。