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葉綠素的定量測定嘗試
[2015/9/10] 選擇玩法人生道理:按照葉綠素對可見光的接收光譜,操縱分光光度計在某一特定波長下測定其光密度,爾后用公式計較出葉綠素含量,此法切確度高,且能在未經分手的環境下別離測出葉綠素a、b的含量。
按朗伯-比爾定律,某有色溶液的光密度D與其濃度C及液層厚度L成反比,即:
D=kCL k為比例常數,當溶液濃度以分量百分濃度為單元,液層厚度為1厘米時,k稱為該物資的比接收系數。
倘若氫氧化鈉硫酸銅溶液中含數種吸光運輸,則此氫氧化鈉硫酸銅溶液在某些主吸光度下的總光體積強度就是各酚類化合物在出現異常主吸光度下光體積強度的乘積,這那就是光體積強度的加和性。
葉綠素a、b在紅光區的最大接收峰別離位于663nm 和645nm,在波長663nm下,葉綠素a、b的80%丙酮溶液的比接收系數別離為82.04和9.27,在波長645nm下別離為16.75和45.6,可據此得葉綠素總量CT。
別的,因為葉綠素a、b在652nm處有不異的比接收系數(均為34.5),也可在此波長下測定一次消光度(D652)而求出葉綠素a、b的總量。
議器、辦公耗材:獨特葉輪異丙醇研缽漏斗天坪鉸剪燒杯過濾棉量筒分光光度計
來嘗試方法:稱取新穎葉片0.5克,剪碎置研缽中,加少許碳酸鈣和石英砂,并插手2-3 ml 80%丙酮,研成勻漿,再插手10ml80%丙酮,持續研磨充實,用一層加丙酮潮濕過的濾紙過濾,再用少許丙酮將濾紙和研缽上的色素沖刷清潔,定容至25ml容量瓶中,搖勻。
吸收葉綠素丙酮提取液2ml,加80%丙酮2ml濃縮后,倒入1cm比色杯中,用分光光度計別離在波長645nm、663nm和652nm下測定光密度,以80%丙酮為空缺對比。
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