測試個人信息：白臘切塊

化學藥品、化學藥品盒：HCl二甲苯乙醇SSCPBS鏈霉卵白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸銨

測試儀器、消耗品：著色盤增濕器盒載玻片烤箱水浴鍋孵化箱

試 過程： 
1.籌辦脫蠟/再水化體系（可反復利用數次）及0.2mol/l HCl同時，將載有切片樣品的載玻片（玻片盒中，于-20℃或-70℃儲存）置室溫。起頭預熱2×SSC至70℃（步驟5中利用）。
2.在加有二甲苯的染色盤中停止切片脫蠟，改換二甲苯3次，毎次同隔2min（對載有未經包埋單細胞的玻片則無須要）。 
3.經由進程以下各組染色盤停止再水化。100%乙醇2次，每次2min；95%乙醇2 min；70%乙醇2min，50%乙醇2 min。 
4.樣品室溫下于0.2 mol/l HCl中變性20 min。
5.樣品在70℃ 2×SSC中熱變性15min，浸于1×PBS，2min。
6.在新配制的4%PFA牢固液中停止樣品后牢固，置室溫5min。于3×PBS中停止牢固3min，繼以1×PBS浸2次，每次30s。
7.在含10mmol/lDTT的1×PBS中均衡樣品，置45℃水溶10min。
8.以新配制的封阻液停止封鎖。置45℃水浴30min，水浴時用鋁箔籠蓋（碘乙酰胺對光敏感）。
9.室溫下，以1×PBS浸洗2次，每次2min。
10.于新配制的TEA緩沖液中，均衡樣品2min，移玻片架于新的TEA緩沖液中，并加乙酸酐至0.25%終濃度。疾速夾雜，并在攪拌環境下，浸泡玻片5min。再加乙酸酐至0.5%終濃度，再浸泡5min。
11.樣品移至2×SSC中浸泡5min。
12.別離以50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇和100%乙醇（2次）浸泡停止樣品脫水。室溫下，每次2min（用步驟3乙醇溶液）。
13.氛圍枯燥樣品（或于枯燥器中枯燥）持續嘗試前應確證樣品相對枯燥，樣品放在加有枯燥劑的玻片盒中，于-70℃干貯。
14.離心乙醇沆淀的反鏈及正鏈35S標記的核酸探針和S-核糖核酸探針合作物。積淀干后，以5μl 無菌的5mmol/l DTT消融積淀。加2.5μl（反映的半量）S-核糖核酸探針合作劑于反鏈及正鏈核糖核酸探計中。
15.100℃加熱3min，使探針變性。
16.當即加充足雜交液A，使探針終濃度為0.3μg/ml，充實夾雜。測定噴射活性（希冀噴射活性計數值≥1×105cpm/μl）。將管置45℃水浴（雜交溫度）。
17.謹慎在標本上鋪加恰當探針（如用加樣吸頭，按20μl/20 mm3 鋪加，起頭雜交）。
18.置樣品于加濕盒中（載玻片程度安排），加濕盒內插手加濕盒溶液A，于 45℃溫育雜交恰當時候。雜交時候可停止30 min~4 h（須均衡濕盒內液體并謹慎密封濕盒，由于若是樣品干了，將致使高雜交本底呈現，加濕盒溶液與雜交夾雜液的滲入壓必須不異，以防止雜交液稀釋或稀釋）。
19.雜交進程最初一小時時代，籌辦并預熱洗液A、B、C。
20.起頭洗玻片，將載玻片浸入55℃ 100ml 洗液A中，當即放入玻片架并放入盛有溶液A的染色盤中。
21.在55℃溶液A中洗2次，每次15min 持續在55℃溶液B中洗2次，每次15min。而后，室溫下，以溶液C洗2次，每次2min。
22.每玻片上加500μl RNA酶消化液，籠蓋樣品全數，將玻片放入加濕盒中（盛有水），表明RNA酶公用。室溫安排15min。
23.在50℃洗液C中，遲緩振搖洗玻片2次，每次30min。再于50℃洗液A中，遲緩搖洗玻片2次，每次30min 持續在室溫下，以2×SSC洗玻片2次，毎次5min。
24.經以下各組液體中（毎次2min）停止脫水處置：50%乙醇 / 0.3mol/l 乙酸銨、70%乙醇 / 0.3mol/l 乙酸銨、90%乙醇 / 0.3mol/l 乙酸銨、100%乙醇。
25.氛圍中枯燥載玻片。壓膠片暴光最少過，而后停止乳膠噴射自顯影。

側重事變： 
1.以上一切步驟均是將承有樣品的載玻片置于玻片架中，并在盛有指定溶液的玻璃染色盤中停止，除非還有申明，一切溶液均為新配制，并只利用一次。
2.碘乙酰胺和N-乙基馬來酰亞胺為劇毒物，應謹慎操縱。