原代細胞培育中最經常使用的是分手細胞培育之一。分手細胞培育，行將構造塊用機器法或化學法使細胞分手。如欲從胎兒或重生兒的構造分手到活性最好的游離細胞，典范的方式是用卵白水解酶(如胰卵白酶和膠原酶)消化細胞間的連系物，或用金屬離子螯合劑(如EDTA)撤除細胞相互粘著所依靠的Ca2+，再經機器輕度振蕩，使之成為單細胞。

　　舉例：神經細胞分手培育嘗試-根基手藝指南

　　從神經構造解離到成立原代細胞培育凡是須要幾天，乃至數周。這個進程不只煩瑣， 還很枯燥。實在另有一種捷徑，幾個小時就可以或許實現從神經構造到體外培育細胞系的發生。 這個無縫的流程讓研討職員充實操縱了可貴的樣品，同時另有可貴的時候。本文就舉個例 子，申明一下從構造樣品到細胞培育的每步。

　　步驟1：神經構造解離

　　神經構造的解離是第1步。Neural Tissue Dissociation Kit可以或許或許將胚胎、新 生或成體來歷的構造暖和解離成單細胞懸液。兩步的酶解進程只須要不到一個小時，就可以或許 發生大批下流闡發即用的活細胞。解離進程可以或許手工實現，也可主動實現。

　　解離過 程以下：

　　將腦構造切成小塊，搜集在HBSS中，300×g離心2分鐘 → 插手預熱的酶混 合物1，37°C孵育 → 再插手酶夾雜物2 → 解離(手工解離或主動解離)→ 加到30 μm 細胞濾器中，用HBSS洗濯兩次

　　步驟2：髓磷脂碎片的去除+神經細胞的分手

　　取得了單細胞 懸液以后，下一步便是目標細胞的分手。在細胞分手方面，MACS手藝無疑是金規范，目 前頒發的文獻已達12000多篇。別急，在細胞分手之前另有一個小插曲。那便是去除對后 續免疫標記有攪擾的髓磷脂(myelin)。美天旎比來推出的Myelin Removal Beads可以或許或許從 神經細胞懸液中去除髓磷脂，標記+分手的全進程只須要35分鐘。

　　髓磷脂的去除是了為收受接管率。做過比對嘗試，將步驟1獲得的細胞懸液分紅兩組，一組用Myelin Removal Beads處置，一組不處置。而后別離從兩組平分手神經前體細胞。第一組 (處置過)的收受接管率達95%，第二組(未處置)只要80%。

　　步驟3：神經細胞培育 分手到了你想要的神經細胞， 下一步便是原代細胞培育了。