1.嘗試資料：

　　1.1培育基：如做大腸桿菌的藥敏嘗試可挑選通俗養分瓊脂或麥康凱培育基，做梵衲氏菌可挑選SS培育基，巴氏桿菌可挑選血液瓊脂。

　　1.2藥敏試紙：采辦、便宜或廠家供給

　　1.3細菌：從病雞病變部位提取，如肝臟、心臟、脾臟等臟器。

　　1.4接種環、酒精燈、打孔器、牛津杯

　　1.5移液器、滴頭

　　2.嘗試籌辦：

　　2.1藥敏片的籌辦：便宜

　　2.1.1藥敏片的制備：取定性濾紙，用打孔機打成6毫米直徑的圓形小紙片，取圓紙片50片放入潔凈枯燥的青霉素空瓶中，瓶口以單層牛皮紙包扎，經15磅15-20分鐘高壓消毒后，放在37℃溫箱或烘箱中數天，使完整枯燥。

　　2.2.2抗菌藥紙片建造：在上述含有50片紙片的青霉素瓶內插手藥液適當，并翻動紙片，使各紙片充實滲透藥液，翻動紙片時不能將紙片搗爛。同時在瓶口上記實藥物稱號，放37℃溫箱內留宿，枯燥后即密封，切勿受潮，置陰晦枯燥處寄存，有用期3-6個月。

　　2.2藥液的制備(用于商品藥的嘗試)：按商品藥醫治量3-5倍比例配制藥液;如醫治量為1L水加1g藥，配制藥液時便是1g加200-300ml水或1L水加3-5g藥，及配制藥敏片所用的藥液。

　　3.嘗試操縱體例：

　　3.1藥敏片法

　　3.1.1在“超凈臺”(或便宜無菌操縱臺)中，用(酒精燈)經火焰滅菌的接種環從病猜中挑取適當細菌培育物，以劃線體例將細菌涂布到平皿培育基上。詳細體例：用滅菌接種環取適當細菌別離在平皿邊緣絕對四點涂菌，以每點起頭劃線涂菌至平皿的1/2，而后找到第二點劃線至平皿的1/2，順次劃線，直至細菌平均密布于平皿。(另：可將待試細菌于少許心理鹽水中制成細菌混懸液，將少許混懸液倒入平皿培育基上，輕晃平皿使鋪勻，安排5-10min)。

　　3.1.2將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停，取藥敏片貼到平皿培育基外表。為了使藥敏片與培育基慎密相貼，可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能切確的察看成果，請求藥敏片能有紀律的散布于平皿培育基上，普通可在平皿中間貼一片，外周可等間隔貼多少片(外周普通可貼4-5片)，每種藥敏片的稱號要記著。

　　3.1.3將平皿培育基顛倒放于37℃溫箱中培育24小時后，察看成果。

　　4.成果察看：

　　在涂有細菌的瓊脂平板上，抗菌藥物在瓊脂外向四周分散，其濃度呈梯度遞加，是以在紙片四周必然間隔內的細菌發展遭到按捺。留宿培育后構成一個抑菌圈，抑菌圈越大，申明該菌對此藥敏理性越大，反之越小，若無抑菌圈，則申明該菌對此藥具備耐藥性。其直徑巨細與藥物濃度、劃線細菌濃度有間接干系。

　　5.鑒定規范：

　　5.1藥敏嘗試的成果，應按抑菌圈直徑巨細作為鑒定敏感度高低的規范。

　　表1 藥物敏感嘗試鑒定規范

　　抑菌圈直徑(毫米)　敏感度

　　20以上極敏

　　15-20高敏

　　10-14中敏

　　10以下低敏

　　0 不敏

　　5.2 藥物敏感嘗試鑒定規范參考表1，抑菌圈直徑在15毫米以上為高敏，10毫米以下為低敏，無抑菌圈為不敏。

　　6.影響藥敏成果的身分：

　　6.1培育基：應按照嘗試菌的養分須要停止配制。傾瀉平板時，厚度適合(約5-6mm)，不可太薄，普通90mm直徑的培育皿，傾瀉培育基18-20ml為好。培育基內應盡量防止有抗菌藥物的拮抗物資，如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和對氨苯甲酸(PABA)能拮抗磺胺藥和TMP的活性。

　　6.2細菌接種量：細菌接種量應恒定，如太多，抑菌圈變小，能產酶的菌株更可粉碎藥物的抗菌活性。

　　6.3藥物濃度：藥物的濃度和總量間接影響抑菌嘗試的成果，需切確配制。

　　6.4培育時辰：普通培育溫度和時辰為37℃、12-24小時，有些抗菌藥分散慢如多粘菌素，可將已放好抗菌藥的平板培育基，先置4℃冰箱內2-4小時，使抗菌藥預分散，而后再放37℃溫箱中培育，能夠推延細菌的發展，而獲得較大的抑菌圈。

　　7.利用

　　藥敏嘗試后，應挑選高敏藥物停止醫治，也可選用兩種藥物輔佐利用，以削減耐藥菌株。挑選高敏藥物時應斟酌藥物的接收路子，由于咱們藥敏嘗試是藥液間接和細菌打仗，而在給禽用藥的時辰，必須經由過程機體的接收能力使藥物到達必然的成果，以是在給禽用藥時，高敏藥物必然要配適合宜的給藥體例，如許才會到達好的醫治成果。

　　附表2 山東省2004年1-5月份大腸桿菌和梵衲氏菌經常使用藥物敏感水平參考表

　　藥物 大腸桿菌 (細菌)梵衲氏菌(細菌)

　　QD-1(菌株)LC-5JN-7LY-1RZ-5QD-2JN-8LY-1

　　新霉素20(抑菌)816

　　前鋒必2826302932333126

　　氟苯尼考22221

　　慶大霉素212

　　諾氟沙星01121

　　氧氟沙星21512

　　前鋒五號62122

　　蒽諾沙星61316

　　丁胺卡那014