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柱層析分手嘗試操縱步驟

[2013/7/23]
  嘗試操縱步驟以下:

  1.肯定枯燥、不含溶劑的待分手粗產物的分量。

  2.用薄層色譜(TLC)拔取溶劑系統,使Rf的值處于0.2~0.3之間。

  3.肯定用于樣品上柱的方式。可有三種挑選:凈試樣法,溶液法(濕法)或硅膠吸附法(干法);對液體和固體,較為遍及的方式是溶液法(濕法)上樣,行將樣品溶于溶劑中,而后將溶液插手分手柱。

  4.肯定適合的硅膠和化合物的比例。對簡略的分手,凡是請求二者的比例為30~50:1(分量比);但對照擬堅苦的分手,須要的比例高達120:1。

  5.拔取適合的分手柱——硅膠量決議了分手柱的尺寸,普通選用短而粗的加壓柱。

  6.拔取適合的搜集用容器——將硅膠體積除以4,而后拔取能裝下這個體積的容器便可(20L的硅膠對應于5 L的組分)。

  7.裝柱。戴好活性炭口罩,在(落地)透風櫥中裝好分手柱,干法和濕法裝柱都可,只需能把柱子裝實就行。裝完的柱子應當要過度的慎密(太密了淋洗劑走的太慢),必然要平均(不然樣品就會從一側斜著上去)。

  8.加樣。用少許的溶劑消融待分手粗品,加樣,加完后將上面的活塞翻開,待溶劑層降落至石英砂面時,插手淋洗劑,一起頭不要加壓,等溶樣品的溶劑和樣品層有一段間隔(2~4cm),再加壓,如許防止了溶劑(如二氯甲烷等)夾帶樣品疾速下行。

  9.樣品的搜集。一邊搜集樣品,一邊停止色譜闡發(TLC、LC-MS或HPLC)跟蹤柱子的分手歷程。

  10.將所需純度的流出組分歸并后用扭轉蒸發儀停止稀釋。

  11.當完整撤除溶劑后,停止闡發(LC-MS、HPLC、或NMR等),稱重。

  12.按相干規程停止清場處置。