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蔬果中維生素C含量的檢測方式
[2013/7/12]
蔬菜、生果中維生素c的測定方式有良多,如間接原子接收分光光度法、分光光度法、高效液相色譜法等,各類方式各有特色。文章對最近幾年來有關維生索c的測定方式停止了綜述。
維生素C又叫抗壞血酸(Ascorbicid),普遍存在于動物構造中,新穎的生果、蔬菜中含量較多。是一種水溶性小份子生物活性物資,也是人體須要量最大的一種維生素。維生素C具備復原性(其布局式如圖1),能夠與良多氧化劑發生氧化復原反映,是以能夠操縱其復原性測定維生素C的含量。今朝食物中測定維生素C含量的方式首要有碘量法,是操縱維生素C的氧化復原性為根本的一種氧化復原方式。岡其酸度不易掌握,碘須要標定且易揮發,而Vc不易不變保管,使測定成果易呈現偏差,且這類方式不合適微量闡發;國標GB/T6195-1986是接納2,6一二氯靛酚滴定法。操縱樣品溶液由藍色改變為粉白色來區分其滴定起點的到達。可是大都生果、蔬菜樣品其提取液都具備必然的光彩而致使滴定起點不較著,使測定精確度下降。別的另有熒光光譜闡發法 J、紫外一可見分光度法、色譜法、電化學法等,這些方式都存在著必然的規模性,如操縱進程龐雜,所用試劑不不變,速率慢、背景¨攪擾大。最近幾年來,成立的測定Vc的其余方式另有催化能源學和光度法相連系的方式,及VC傳感器測定方式,牢固pH滴定法等。
該論文將對蔬菜、生果經常利用的維生素C含量的檢測方式停止綜述、比擬。
1原子接收分光光度法
操縱原子接收分光光度法問接測定維生素C的含量,是操縱維生素C能夠與一些金屬離子發生氧化復原反映,經由過程測定反映掉的金屬離子的量,進而間接計較出維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法
以銀離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法,是操縱維生素C份子中的有二烯醇基具強復原性,可被硝酸銀氧化為去氫維生素C,同時發生玄色銀積淀(反映式如圖2)。
積淀經離心分手后,將分手獲得的積淀用硝酸消融后,再操縱原子接收分光光度計測定銀離子的含量,從而接測得維生素C含量,詳細測定方式以下:
配制一系列濃度的維生素C規范溶液,順次接收必然量的維生素C規范溶液置于10mL離心管中,別離插手2mL(1mg/mL) Ag+規范溶液,而后加水使整體積為4mL,搖勻,在室溫下避光安排35min離心分手棄去上清液,用2mL超純水洗濯積淀3次,而后用l:1的濃硝酸3mL消融積淀,移入50mL的容量瓶中,加水濃縮至刻度。噴入氛圍-乙炔火焰別離測定其吸光度,以維生素C規范溶液的濃度為橫坐標,以測得的吸光度值為縱坐標繪制規范曲線。最初將處置過的待測樣按上述方式測定其維生素C含量。
上述方式巾維生素C規范溶液及樣品的配制都是操縱2%的檸檬酸作為溶劑,并在棕色瓶中保管,緣由是維生素C在溶液中不不變,遇氧氣、光、熱、堿性物資易受粉碎,而在恰當的酸性前提下比擬不變,用2%的檸檬酸溶液來配制維生素C規范溶液,減緩了維生素C被氧化的速率,同時消弭了必然外界身分的十擾,使得測定成果比擬不變。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法
文獻中報道了以銅離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法。該方式也是操縱維生素C在酸性介質中維生素C可將Cu2+定量的復原為Cu+,而后Cu+與SCN-反映天生CuSCN積淀,在高速離心計心情下有用地分手出CuSCN積淀,洗濯后再經濃硝酸消融,用原子接收法測定積淀中的含銅量,便可推知樣品中維生素C的含量。詳細測定方式以下:
別離接收1mL配制的含必然量維生素C的規范溶液(隨配隨用)(別離含維生素C 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液,順次安排于已編號的15mL離心管中,各插手1mLCuSO4飽和溶液、1mL濃度為2%硫氰酸銨溶液、0.5mL鹽酸-醋酸鈉緩沖液和0.5 mL飽和NaCl溶液充實混和,稍后離心分手,棄去下層清液,謹慎地用少許水洗濯積淀2~3次(注重每次用水不能跨越1 mL),插手0.5mL硝酸消融后,轉移至lO0mL的容量瓶中加水定容至刻度線,搖勻。別離用原子接收分光光度計測定其含銅量,由所得的維生素C含量的規范曲線,能夠獲得響應樣品的嘗試成果。
該方式所得的嘗試成果絕對規范偏差RSD在5%之內加標收受接管率在96.56%~100.67%,其精密度和精確度均到達痕量闡發請求。此方式的線性相干系數R=O 9989,標明相干性很好。
2紫外可見分光光度法
操縱紫外分光光度法測定維生素C的含量是基于維生素c在紫外光區有特色接收,可是由于維生素C布局中具備不飽和鍵,具備復原性,不易不變存在,間接測定偏差較大。以是在操縱紫外分光光度法測定時,維生素規范溶液和待測樣的配制前提很是主要。曾國富,黃玉英研討發明,維生索C在CTAB-C5H11OH-H2O微乳液系統中很是不變,它存在于微乳液滴膜的內側,與滲入進入液滴膜外側的溶液氧打仗的機遇少少,該系統能極大地進步維生素C的不變性。
鄭京同等操縱維生素C具備對紫外發生接收和對堿不變的特征,成立了紫外分光光度疾速測定生果、蔬菜維生素c的新方式。按照維生素C具備對紫外發生接收和對堿不不變的特征,于波長243nm處測定樣品溶液與堿處置樣品二者吸光度之差,經由過程查校準曲線,便可計較樣品巾維生素C的含量。此法操縱簡略、疾速精確、重現性好,成果使人對勁。出格合適含深色樣品的測定。嘗試成果標明該方式簡略易行,成果精確、活絡度高,檢出限低,可疾速測定生果、蔬菜中維生素C,值得推行利用。
張立科等先容了在0~450µg/mL線性規模內,以cu2+作催化劑,以消融氧將復原型維生素C氧化為在246.0 nm處無接收的氧化型Vc,完成了樣品各紫外攪擾成份的本底校訂,成立了種測定果蔬Vc的新方式。該方式中維生素C粉碎前提的挑選尤其主要,肯定前提為:Cu用量為30 g,反映溫度為70℃,反映時候為20min,加熱前提下,反映速率快,無需加遮掩劑。方式簡潔、疾速、精確,測定了香蕉、西紅柿等果蔬中的VC含量,成果使人對勁。經屢次嘗試得出該方式RsD在0.32%~0.89%之間,現實測定了香蕉、西紅柿等樣品中的VC的含量,檢出限為0.2791g/mL,加標收受接管率在97.16%~100.18%之間 。
3高效液相色譜法
后面先容的方式由于在利用中有必然的限定,操縱龐雜、前處置較費事。是以在利用中有較大的規模性,目標已逐步被高效液相色譜法所代替。HPLC法具備檢測速率快、操縱簡略、嘗試成果靠得住等特色。
王艷穎,姜國斌等接納HYPERSIL-C8fz譜柱、濃度0.1%的草酸作活動相的高效液相色譜法,闡發了草莓中的維生素c含量,獲得了抱負的成果。HPLC檢測前提以下:
活動相0.1%草酸溶液,流速1.0 mL/min;檢測波長254 nm,進樣量5µL,柱箱溫度3O℃。該方式闡發中受樣品中其余雜質的影響較小。測定草莓中維生素C的含量,收受接管率為97.4%~102.1%,申明該方式具備所需試劑少、不變、操縱簡潔等特色。精密度嘗試的絕對規范偏差小于3%,申明該方式反復性和再現性都是比擬高的。
陳昌云等接納0.05 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液:甲醇=80:20(v/v)作活動相。流速為1.0 mL/min,二極管陣列檢測器,檢測波長為254 nm。測定蜜柚中維生素C含量在品德濃度為20~100mg/L規模內有杰出的線性干系,方式收受接管率為92.4%~107.5%,絕對規范偏差小于2%。
4 結語
測定維生素C含量方式良多,各類方式各有優錯誤謬誤,由于維生素C本身的不不變,致使了良多方式測定成果偏差較大,以是對維生素C不變存在前提的摸索很是主要。高效液相色譜法由于測定較精確、活絡度高、挑選性好,有較好的成長遠景,是今朝成長較快的一種方式。
維生素C又叫抗壞血酸(Ascorbicid),普遍存在于動物構造中,新穎的生果、蔬菜中含量較多。是一種水溶性小份子生物活性物資,也是人體須要量最大的一種維生素。維生素C具備復原性(其布局式如圖1),能夠與良多氧化劑發生氧化復原反映,是以能夠操縱其復原性測定維生素C的含量。今朝食物中測定維生素C含量的方式首要有碘量法,是操縱維生素C的氧化復原性為根本的一種氧化復原方式。岡其酸度不易掌握,碘須要標定且易揮發,而Vc不易不變保管,使測定成果易呈現偏差,且這類方式不合適微量闡發;國標GB/T6195-1986是接納2,6一二氯靛酚滴定法。操縱樣品溶液由藍色改變為粉白色來區分其滴定起點的到達。可是大都生果、蔬菜樣品其提取液都具備必然的光彩而致使滴定起點不較著,使測定精確度下降。別的另有熒光光譜闡發法 J、紫外一可見分光度法、色譜法、電化學法等,這些方式都存在著必然的規模性,如操縱進程龐雜,所用試劑不不變,速率慢、背景¨攪擾大。最近幾年來,成立的測定Vc的其余方式另有催化能源學和光度法相連系的方式,及VC傳感器測定方式,牢固pH滴定法等。
該論文將對蔬菜、生果經常利用的維生素C含量的檢測方式停止綜述、比擬。
1原子接收分光光度法
操縱原子接收分光光度法問接測定維生素C的含量,是操縱維生素C能夠與一些金屬離子發生氧化復原反映,經由過程測定反映掉的金屬離子的量,進而間接計較出維生素c的含量。
1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法
以銀離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法,是操縱維生素C份子中的有二烯醇基具強復原性,可被硝酸銀氧化為去氫維生素C,同時發生玄色銀積淀(反映式如圖2)。
積淀經離心分手后,將分手獲得的積淀用硝酸消融后,再操縱原子接收分光光度計測定銀離子的含量,從而接測得維生素C含量,詳細測定方式以下:
配制一系列濃度的維生素C規范溶液,順次接收必然量的維生素C規范溶液置于10mL離心管中,別離插手2mL(1mg/mL) Ag+規范溶液,而后加水使整體積為4mL,搖勻,在室溫下避光安排35min離心分手棄去上清液,用2mL超純水洗濯積淀3次,而后用l:1的濃硝酸3mL消融積淀,移入50mL的容量瓶中,加水濃縮至刻度。噴入氛圍-乙炔火焰別離測定其吸光度,以維生素C規范溶液的濃度為橫坐標,以測得的吸光度值為縱坐標繪制規范曲線。最初將處置過的待測樣按上述方式測定其維生素C含量。
上述方式巾維生素C規范溶液及樣品的配制都是操縱2%的檸檬酸作為溶劑,并在棕色瓶中保管,緣由是維生素C在溶液中不不變,遇氧氣、光、熱、堿性物資易受粉碎,而在恰當的酸性前提下比擬不變,用2%的檸檬酸溶液來配制維生素C規范溶液,減緩了維生素C被氧化的速率,同時消弭了必然外界身分的十擾,使得測定成果比擬不變。
1.2 以銅離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法
文獻中報道了以銅離子作為氧化劑的間接原子接收分光光度法。該方式也是操縱維生素C在酸性介質中維生素C可將Cu2+定量的復原為Cu+,而后Cu+與SCN-反映天生CuSCN積淀,在高速離心計心情下有用地分手出CuSCN積淀,洗濯后再經濃硝酸消融,用原子接收法測定積淀中的含銅量,便可推知樣品中維生素C的含量。詳細測定方式以下:
別離接收1mL配制的含必然量維生素C的規范溶液(隨配隨用)(別離含維生素C 50、100、200、300、400、500 µg)和樣品提取液,順次安排于已編號的15mL離心管中,各插手1mLCuSO4飽和溶液、1mL濃度為2%硫氰酸銨溶液、0.5mL鹽酸-醋酸鈉緩沖液和0.5 mL飽和NaCl溶液充實混和,稍后離心分手,棄去下層清液,謹慎地用少許水洗濯積淀2~3次(注重每次用水不能跨越1 mL),插手0.5mL硝酸消融后,轉移至lO0mL的容量瓶中加水定容至刻度線,搖勻。別離用原子接收分光光度計測定其含銅量,由所得的維生素C含量的規范曲線,能夠獲得響應樣品的嘗試成果。
該方式所得的嘗試成果絕對規范偏差RSD在5%之內加標收受接管率在96.56%~100.67%,其精密度和精確度均到達痕量闡發請求。此方式的線性相干系數R=O 9989,標明相干性很好。
2紫外可見分光光度法
操縱紫外分光光度法測定維生素C的含量是基于維生素c在紫外光區有特色接收,可是由于維生素C布局中具備不飽和鍵,具備復原性,不易不變存在,間接測定偏差較大。以是在操縱紫外分光光度法測定時,維生素規范溶液和待測樣的配制前提很是主要。曾國富,黃玉英研討發明,維生索C在CTAB-C5H11OH-H2O微乳液系統中很是不變,它存在于微乳液滴膜的內側,與滲入進入液滴膜外側的溶液氧打仗的機遇少少,該系統能極大地進步維生素C的不變性。
鄭京同等操縱維生素C具備對紫外發生接收和對堿不變的特征,成立了紫外分光光度疾速測定生果、蔬菜維生素c的新方式。按照維生素C具備對紫外發生接收和對堿不不變的特征,于波長243nm處測定樣品溶液與堿處置樣品二者吸光度之差,經由過程查校準曲線,便可計較樣品巾維生素C的含量。此法操縱簡略、疾速精確、重現性好,成果使人對勁。出格合適含深色樣品的測定。嘗試成果標明該方式簡略易行,成果精確、活絡度高,檢出限低,可疾速測定生果、蔬菜中維生素C,值得推行利用。
張立科等先容了在0~450µg/mL線性規模內,以cu2+作催化劑,以消融氧將復原型維生素C氧化為在246.0 nm處無接收的氧化型Vc,完成了樣品各紫外攪擾成份的本底校訂,成立了種測定果蔬Vc的新方式。該方式中維生素C粉碎前提的挑選尤其主要,肯定前提為:Cu用量為30 g,反映溫度為70℃,反映時候為20min,加熱前提下,反映速率快,無需加遮掩劑。方式簡潔、疾速、精確,測定了香蕉、西紅柿等果蔬中的VC含量,成果使人對勁。經屢次嘗試得出該方式RsD在0.32%~0.89%之間,現實測定了香蕉、西紅柿等樣品中的VC的含量,檢出限為0.2791g/mL,加標收受接管率在97.16%~100.18%之間 。
3高效液相色譜法
后面先容的方式由于在利用中有必然的限定,操縱龐雜、前處置較費事。是以在利用中有較大的規模性,目標已逐步被高效液相色譜法所代替。HPLC法具備檢測速率快、操縱簡略、嘗試成果靠得住等特色。
王艷穎,姜國斌等接納HYPERSIL-C8fz譜柱、濃度0.1%的草酸作活動相的高效液相色譜法,闡發了草莓中的維生素c含量,獲得了抱負的成果。HPLC檢測前提以下:
活動相0.1%草酸溶液,流速1.0 mL/min;檢測波長254 nm,進樣量5µL,柱箱溫度3O℃。該方式闡發中受樣品中其余雜質的影響較小。測定草莓中維生素C的含量,收受接管率為97.4%~102.1%,申明該方式具備所需試劑少、不變、操縱簡潔等特色。精密度嘗試的絕對規范偏差小于3%,申明該方式反復性和再現性都是比擬高的。
陳昌云等接納0.05 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液:甲醇=80:20(v/v)作活動相。流速為1.0 mL/min,二極管陣列檢測器,檢測波長為254 nm。測定蜜柚中維生素C含量在品德濃度為20~100mg/L規模內有杰出的線性干系,方式收受接管率為92.4%~107.5%,絕對規范偏差小于2%。
4 結語
測定維生素C含量方式良多,各類方式各有優錯誤謬誤,由于維生素C本身的不不變,致使了良多方式測定成果偏差較大,以是對維生素C不變存在前提的摸索很是主要。高效液相色譜法由于測定較精確、活絡度高、挑選性好,有較好的成長遠景,是今朝成長較快的一種方式。
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