成立了同時檢測化裝品中24種防腐劑含量的反相高效液相色譜法(RP2HPLC)。接納KromasilC18(4.6mm×250mm,5μm)色譜柱,以磷酸鹽緩沖溶液(pH=4.26)為活動相,梯度洗脫。樣品經甲醇超聲提取,而后接納RP2HPLC2二極管陣列檢測法測定,對樣品前處置和色譜前提停止研討和優化。方式的絕對規范誤差為1.3%～3.3%;收受接管率為90.6%～97.8%;各類防腐劑的線性相干系數≥0.9997,具備較高的切確度和精密度,可用于化裝品中24種防腐劑含量的闡發。

　　關頭詞:反相高效液相色譜,化裝品,防腐劑

　　1弁言

　　化裝品中的防腐劑是為了使化裝品在出產、利用和保管進程中免受微生物凈化的一類化裝品增添劑。但大大都防腐劑對人的皮膚會發生差別程度的安慰。是以,化裝品中防腐劑的用量必須以寧靜性作為前提。我國《化裝品衛生規范》對化裝品中防腐劑的利用濃度和規模做了相干的劃定。今朝,國際外對化裝品中防腐劑的測定普通多接納高效液相色譜法、氣相色譜法、氣相色譜質譜法、膠束電動色譜法、毛細管電泳法和伏安法等,而同時測定的防腐劑普通僅為4～8種,最多可同時測定18種,接納的方式均為氣相色譜-質譜法。

　　本嘗試研討了化裝品中的24種經常使用防腐劑的樣品前處置方式和HPLC分手前提,成立了化裝品中24種經常使用防腐劑同時檢測的HPLC法。成果標明,本方式簡潔、疾速、切確,利用于現實化裝品中防腐劑的測定,成果對勁。

　　2嘗試局部

　　2.1儀器與試劑

　　高效液相色譜儀,由四元高壓泵、柱溫箱、二極管陣列檢測器及主動進樣器構成。

　　對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯、水楊酸、5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮、苯甲醇、苯氧基乙醇、4-氯-3-甲苯酚、三氯生及三氯卡班(Sigma公司);苯甲酸甲酯、苯甲酸乙酯、苯甲酸苯酯及溴硝丙醇(AcrosOrgnics公司);2,4-二氯-3,5-二甲酚、對羥基苯甲酸異丙酯、2-苯酚、4-氯-3,5-二甲酚、對羥基苯甲酸異丁酯及2-芐基-4-氯酚(東京化成產業股份無限公司);苯甲酸、山梨酸(國度規范物資中間)。乙腈為色譜純,甲醇為優級純;無水乙醇、四氫呋喃等試劑均為國產闡發純;Millipore超純水。

　　2.2規范品夾雜溶液和供試品溶液的制備

　　別離切確稱取必然量的24種防腐劑規范品,用甲醇溶液定容,配制成2g/L的規范儲蓄液。別離移取必然體積的上述規范儲蓄液至100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,配成夾雜規范儲蓄液。切確稱取化裝品0.2g(切確到0.001g)于50mL錐形瓶中,插手10mL甲醇,超聲提取30min,取局部溶液放入離心管中,在離心計心情上以5000r/min高速離心10min后,取上清液經0.22μm濾膜過濾,濾液供RP-HPLC檢測。

　　2.3色譜前提

　　色譜柱:伊利特KromasilC18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm);活動相:A.甲醇,B.0.025mol/LNaH2PO4溶液,pH4.26。線性梯度洗脫前提見表1。流速:1.0mL/min;柱溫:25℃;檢測波長:法式可變波長掃描;進樣量:10μL。

　　3成果與會商

　　3.1活動相的挑選

　　3.1.1緩沖溶液pH的挑選在24種防腐劑中,受pH影響的只要苯甲酸、山梨酸和水楊酸。是以,側重考查了差別pH值(2.5～5.5)對以上3種酸分手環境的影響。發明在pH4.26時,苯甲酸、山梨酸和水楊酸能與溴硝丙醇、苯甲醇、苯氧基乙醇和對羥基苯甲酸甲酯到達很好的分手,峰形杰出。

　　3.1.2NaH2PO4濃度的挑選在考查了0.01、0.025和0.05mol/LNaH2PO4溶液對分手的影響后,發明0.025mol/LNaH2PO4可到達較好的分手,且峰形杰出。

　　3.2檢測波長的挑選

　　經由過程全波長掃描可得到24種物資各自的接收圖譜。綜合各物資在差別波長下的呼應值和差別波長對基線的影響,終究肯定接納法式可變波長停止掃描,即按照差別組分的出峰挨次,在差別時候段,別離用各組分的最好接收波長停止檢測,從而進步檢測的活絡度,到達最好的掃描成果。

　　3.3樣品提取方式的挑選

　　3.3.1樣品提取溶劑的挑選在不異的色譜前提下,比擬了甲醇、乙醇、四氫呋喃和活動相稱4種溶劑對差別品種化裝品(膏霜類、水類、固體類)的提取成果。成果標明,乙醇和四氫呋喃提取后的色譜圖在2.0～4.5min的色譜峰的峰形欠佳,沒法切確計較溴硝丙醇和水楊酸的含量,而活動相提取口紅時,不能將口紅完整消融,且在28.26min時基線攪擾較大,影響被測物資含量的測定。從提取成果可看出,乙醇、四氫呋喃和活動絕對某些物資的提取率偏低,而甲醇對各物資的提取率都較高,提取成果最好,是以挑選甲醇作為樣品超聲提取的溶劑。

　　3.3.2超聲波提取時候的挑選研討了10～60min差別時候段內,超聲波的提取率。發明30min以上對提取率不較著增大,且跟著超聲時候的耽誤,會使超聲波儀器內的水溫回升,致使某些易揮發的成份揮發,反而下降了提取率。以是,綜合斟酌,挑選30min為超聲提取時候。圖1是24種防腐劑在肯定的色譜前提下的液相色譜圖。

　　3.4線性干系、檢出限、收受接管率和精密度

　　在肯定的最好分手色譜前提下,配制一系列差別濃度的夾雜規范溶液停止色譜測定,以各組分的峰面積(Y)對濃度X(mg/L)繪制規范曲線。當信噪比(S/N)為3時,測得各防腐劑組分的檢出限。各組分的線性方程、相干系數和檢出限。

　　稱取3種經測定含防腐劑較少,且基線攪擾較小的化裝品0.2g(切確到0.001g),別離增添高、中、低3個濃度程度的夾雜規范溶液,每種樣品反復6次,按上述嘗試前提停止樣品處置和測定,計較收受接管率和精密度。

　　3.5現實樣品闡發

　　用所成立的檢測方式,對膏霜類、水類和固體類等9個現實化裝品樣品停止測定,以規范樣品色譜圖中各防腐劑的保留時候對化裝品中的防腐劑停止定性,以樣品中各防腐劑色譜峰的峰面積與規范曲線絕對應停止定量闡發。表4僅列出了9個化裝品中檢測出的9種防腐劑的成果(其余15種防腐劑均未檢出)。從成果能夠發明,大大都化裝品中都含有對羥基苯甲酸酯類和苯氧基乙醇,別的品種的防腐劑較少。此中以對羥基苯甲酸甲酯最罕見,含量也較高。

　　綜上所述,接納超聲波提取,高效液相色譜闡發,法式可變波長檢測,同時測定化裝品中24種經常使用防腐劑含量的方式,操縱簡潔,成果靠得住。用于化裝品品德節制,及收支口化裝品查驗具備主要意思。