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液相色譜儀罕見題目闡發及處置

[2012/4/11]
  1、活動相內有氣泡,封閉泵,翻開泄壓閥,翻開purg鍵,洗濯脫氣,氣泡不時從過濾器冒出,進入活動相,不管翻開purge鍵幾回,都沒法斷根不時發生的氣泡。

  緣由分解:

  過濾器持久沉醉于乙酸銨等緩沖液內,過濾器外部因為霉菌的發展滋生,構成菌團,梗阻了過濾器,緩沖液難以流利地經由過程過濾器,氛圍在泵的壓力感化下顛末濾器進入活動相。毛病處置:

  過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲洗濯幾分鐘便可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,悄悄震動幾回,再將過濾器用純水洗濯幾回,翻開泄壓閥,翻開purge鍵洗濯脫氣,如仍有氣泡不時從過濾器冒出,持續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如不氣泡不時從過濾器中冒出,申明過濾器外部的霉菌菌團已被硝酸粉碎,活動相能夠流利地經由過程過濾器。翻開泄壓閥,翻開泵,流速調至1.0~3.0ml/min,純水沖刷過濾器1小時擺布。便可將過濾器洗濯清潔。封閉泄壓閥,純甲醇沖刷半小時便可。

  2、柱壓高

  緣由分解:

  (1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)堆積于柱內;

  (2)樣品凈化堆積。

  毛病處置:

  對第一種環境先用40~50℃的純水,低速正向沖刷柱子,待柱壓逐步降落后,響應進步流速沖刷,柱壓大幅度降落后,用常溫純水沖刷,以后用純甲醇沖刷柱子30分鐘;對第二種環境,由樣品的堆積引發凈化的C18柱,和純水反向沖刷柱子,而后換成甲醇沖刷,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖刷柱子(沖刷時候的是非由樣品凈化的環境而定),再用換成甲醇沖刷,而后用純水沖刷,最初甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。

  3、既無壓力唆使,又無液體流過。

  緣由分解:

  (1)泵密封墊圈磨損;

  (2)大批氣泡進入泵體。

  毛病處置:

  對第一種環境,改換密封墊圈;對第二種環境,在泵感化的同時,用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處贊助抽出氛圍。

  4、壓力動搖大,流量不不變。

  緣由分解:

  體系中有氛圍或單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得二者不能密封。

  毛病處置:

  任務中注重察看活動相的量,保障不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,防止吸入氛圍,活動相要充實脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波洗濯。

  5、出峰不佳,峰分叉。

  緣由分解:

  (1)色譜柱被凈化;

  (2)柱頭填料陷落。

  毛病處置:

  對第一種環境,先用純水反向沖刷柱子,而后換成甲醇沖刷,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖刷柱子(沖刷時候的是非由樣品凈化的環境而定),再換成甲醇沖刷,而后用純水沖刷,最初甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。如沖刷后仍然出峰不佳,則斟酌第二種環境。對第二種環境,擰開柱頭,查抄柱填料是不是硬結或陷落。去除硬結局部(凈化的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內徑不異的頂端光滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊頻頻幾回,直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖刷清潔,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖刷30分鐘以上。

  6、峰面積反復性不佳。

  緣由分解:

  (1)進樣閥漏液;

  (2)加樣針不到位。

  毛病處置:

  對第一種環境改換進樣閥墊圈;對第二種環境保障加樣針插究竟,打針樣品溶液后須疾速、安穩地從LOAD狀況轉換到INJECT狀況,以保障進樣量的精確。平常任務中,液相色譜儀的頤養很是主要,如要注重不要讓氛圍進入輸液體系和高壓泵中,儲液器內的溶液如永劫候未用應洗濯儲液器并改換溶液,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖刷清潔,防止無機鹽析出或堆積;樣品的前處置也很主要,任何樣品都要盡能夠地去除雜質,完整消融,盡可能削減對色譜柱的凈化,以耽誤色譜柱的利用壽命,同時防止打針過濃的樣品溶液,以避免殘留液在進樣閥內析出固體引發梗塞;色譜柱作好標記,用于差別闡發目標的色譜柱不要混用等。