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紫外分光光度法檢測保健食物中大豆異黃酮的含量

[2012/2/11]
  【擇要】目標:以大豆苷元為規范品,用紫外分光光度法檢測三種市售保健品中大豆異黃酮總濃度.方式:保健品用甲醇 水(80 20,V/V)在70℃超聲提取40min,以大豆中的活性成份大豆苷元為規范品,檢測波長254nm,計較樣品含量.成果:回歸方程為Y=0.138X-0.0056,R2=0.9994,線性規模:0.8~6.4mg/L,均勻收受接管率為99.32%,RSD=0.044%.論斷:本方式合用于檢測保健食物中大豆異黃酮含量.

  【關頭詞】保健食物;大豆異黃酮;大豆苷元;紫外分光光度

  0弁言

  大豆異黃酮含量測定的方式良多[1],首要有高效液相色譜法(HPLC),高效液相色譜質譜法(HPLCMS)、氣相色譜法(GC)和毛細管電泳法.咱們接納的紫外分光光度法與別的方式比擬,簡潔快速,且對儀器裝備請求不高,今朝用此方式測定保健食物中大豆異黃酮含量少見報道.

  1資料和方式

  1.1資料

  TU9100型紫外分光光度計(北京瑞利闡發儀器公司);TU1800紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器無限義務公司);RE52AA扭轉蒸發器(上海亞榮生化儀器廠),KQ100型超聲機(昆山市超聲儀器無限公司).大豆苷元規范品(中國藥品生物成品檢定所1502200101).市售保健品3種:安睡美(華博眾生物科技無限公司);天雌(四川旭化華制藥無限公司);欣靚(華北制藥康欣無限公司).甲醇(闡發純).氯仿(闡發純).

  1.2方式

  1.2.1保健品中大豆異黃酮提取與分手取保健品4粒,緊密稱品德,置100mL圓底燒瓶中,加800mL/L甲醇70mL超聲提取40min,趁熱抽濾,甲醇提取液在35℃減壓蒸去甲醇,而后在45℃減壓蒸去水,再加入20mL甲醇消融作為供試品溶液備用.

  1.2.2大豆異黃酮苷元的查驗

  1.2.2.1薄層色譜用硅膠GF254薄層板,以氯仿無水甲醇(10∶0.5)為睜開劑,用規范品和樣品點樣(無水甲醇消融),在254nm紫外燈下檢測,見圖1.

  1.2.2.2紫外分光光度檢測用TU1800紫外可見分光光度計在波段200~400nm前提下別離檢測無水甲醇、規范品、樣品.

  2成果

  2.1規范品溶液的配制及規范曲線的制備[2]切確稱取大豆苷元規范品2.0mg,置于25mL容量瓶中,以甲醇消融并定容至刻線,搖勻.別離緊密吸收規范品溶液0.1,0.2,0.3,0.4,0.6,0.8mL,置于10mL容量瓶中,用甲醇濃縮至刻線,搖勻.以甲醇為空缺,在254nm的波長處測定A值.以濃度為橫坐標,A值為縱坐標繪制規范曲線,得回歸方程Y=0.138X-0.0056,R2=0.9994,線性規模0.8~6.4mg/L.

  2.2含量測定切確量取供試品溶液0.01mL,用無水甲醇濃縮1000倍到10mL定容,用TU9100型紫外分光光度計在波長254nm處測定A值3次,取均勻值.測定成果,按照規范曲線計較樣品含量(表1).表1三種樣品的含量(略)

  2.3緊密度嘗試同一供試品溶液(天雌)0.01mL,用無水甲醇濃縮1000倍到10mL定容,用TU9100型紫外分光光度計在波長254nm處持續測定6次A值,別離為0.102,0.099,0.100,0.100,0.099,0.096,成果RSD=0.133%,申明儀器緊密度較好.

  2.4加樣收受接管率嘗試[3]向已知含量的樣品(天雌)中加入差別量的大豆苷元規范品,按2.2的方式停止含量測定,計較收受接管率,成果見表2.收受接管率的均勻值為99.32%,RSD=0.044%,標明方式的收受接管率較好.表2收受接管率測定成果(略)

  3會商

  因為設置裝備擺設的供測品利用甲醇為溶劑,大豆異黃酮安排進程中能夠有分化,以是停止了不變性嘗試.將同一供試品溶液(天雌)每隔30min測定1次A值,6次測定成果別離為0.102,0.099,0.097,0.095,0.096,0.092,RSD=0.25%,標明供試品溶液在3h內不變.

  4論斷

  紫外分光光度法測定保健食物中大豆異黃酮含量與別的方式比擬簡潔快速,對儀器裝備請求不高,重現性好,合用于保健食物中大豆異黃酮含量的測定.