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高效液相色譜儀利用中需注重的幾個題目

[2011/5/30]
  液相色譜儀在高效利用中需注重以下幾個題目:

  1、色譜柱中的活動相是不是會會排干的題目:

  不少做色譜分手測驗考試的人碰到過如許的景象:不慎未實時補充活動相,泵將溶劑瓶中的活動相吸干了,HPLC體系由此而遏制任務了。如斯環境是不是會破壞色譜柱?泵是不是已將色譜柱中一切活動相都排干了?色譜柱還能利用嗎?現實上,若是泵將溶劑瓶中的活動相吸干,并不會形成色譜柱的破壞。即便泵中布滿了氛圍,泵也不會將氛圍排入色譜柱。由于泵只能保送液體,而不能保送氛圍。

  2、色譜柱變干的題目:

  另外一個更可以或許產生的環境是健忘蓋上色譜柱兩頭的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。一樣,全部色譜柱干枯的環境不太輕易產生,大都可以或許只是色譜柱兩頭的幾個毫米變干了,因揮發掉一切溶劑是色譜柱變干須要相稱長的時候。即便色譜柱真的變干了,也不必然就病入膏肓了。可以或許測驗考試用一種完整脫氣的、外表張力低的溶劑(如經氦氣脫氣的甲醇)沖刷色譜柱以撤除氣體。較低的外表張力有助于浸潤填料外表;已脫氣的溶劑應當可以或許消融并去除滯留在填猜中的氣體。色譜柱約莫須要(以1mL/min的流速)沖一個小時或更多的時候被完全浸潤,規復到一般狀況。

  3、利用PEEK(polyetheretherketone)管路和討論須要注重以下題目:

  若是常常須要轉變流路或改換差別品牌的色譜柱,利用PEEK資料制成的管路和討論會很是便利。PEEK管路輕易毗連;PEEK討論不只無需東西,手擰便可牢固,并且輕易調理錐箍以外的管路長度,便利與差別品牌或規格的色譜柱相毗連。

  利用此類資料的管路須要注重的是:PEEK對鹵代烷烴和四氫呋喃的兼容性不好。固然未察看到上述溶劑消融PEEK資料的較著跡象,但PEEK碰到上述溶劑會變脆。另外一個西藥斟酌的身分是壓力限。不銹鋼管可耐受6000psi的壓力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但大都HPLC利用體系壓力不會跨越3000psi)。

  利用PEEK討論時則無需擔憂討論耐溶劑機能,由于討論幾近或很少與溶劑間接打仗。但手擰牢固的PEEK討論壓力限低于不銹鋼管,因此壓力太高時,可以或許會使討論在管路上滑動而產生死體積或漏液。

  4、防備液相泵的毛病:

  處于杰出操縱狀況的泵,應當能使色譜圖上的基線安穩;保留時候的反復性好。在等度洗脫時壓力動搖小于2%。梯度洗脫時壓力變更應是遲緩和安穩的。 要堅持泵的杰出操縱機能,必須保護體系的潔凈,保障溶劑和試劑的品德,對活動相停止過濾和脫氣.上面列出防備泵毛病的幾項辦法:

  1)用高品德試劑和HPLC級溶劑;

  2)過濾活動相和溶劑;

  3)脫氣;

  4)天天起頭利用時放空排氣,任務竣事后從泵中洗去緩沖液;

  5)不讓水或侵蝕性溶劑滯留泵中;

  6)按期改換墊圈;

  7)須要時加光滑油;

  8)查閱有關泵操縱手冊中的別的倡議。

  9)為了使毛病產生后盡快解除,日常平凡應常備密封、單向閥(進口與出口)、泵頭裝配、百般討論、保險絲等部件,和改換東西。