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攪拌式植物細胞培育罐簡介
[2011/2/16]
攪拌式植物細胞培育罐是多功能培育罐,設置有四氣夾雜體系, 可以或許經由進程設置裝備擺設對應的Spinfilter、無氣泡硅膠管通氣體系、低剪切力攪拌槳等配套配件后,用于植物細胞的分批、流加延續培育。 經由進程變更攪拌槳和通氣體例也可作為微生物培育罐.可完成pH值、pO2、溫度、二氧化碳、營養物主動流加、攪拌速度等主動化節制,可以或許經由進程計較機的長途節制軟件對培育進程停止嚴酷的節制。 除用于植物細胞和微生物的培育外,該體系的能完成生歸天學反映前提(比方pH值、溫度、流加)的緊密范圍內節制, BC2生物反映器體系也可以或許操縱于卵白藥物PEG潤色反映進程的反映前提節制。
攪拌式植物細胞培育罐是最典范、最早被接納的一種細胞培育罐。在諸多細胞培育罐范例中,該種培育罐最能表現植物細胞培育罐的設想理念,它凡是由罐體、管路、閥門、泵及馬達構成,由馬達動員槳葉夾雜培育液,經由進程攪拌器的感化使細胞和營養在培育液中平均散布;罐體上裝配的差別傳感器,用以在線延續檢測培育液的pH、溫度、溶氧等主要參數;小罐體凡是接納硼硅酸鹽玻璃建造,用于嘗試室范圍操縱;大罐體接納不銹鋼材質,用于大范圍出產。今朝,FDA核準的支流出產工藝是攪拌式植物細胞培育罐流加培育工藝,也是以后植物細胞大范圍培育的支流。緣由在于:攪拌式植物細胞培育罐既可用于懸浮細胞培育,也合用于微載體貼壁細胞培育,培育工藝輕易縮小,可以或許為細胞的發展和增殖供給均質的情況;產物品德不變,很是合適于工場化出產生物成品。固然攪拌所產生的剪切力對細胞無害,可是經由進程轉變槳葉的外形和尺寸,或是在培育基中增添一些血清、牛血潔白卵白、葡聚糖及非離子外表活性劑Pluronic F68 等,可下降剪切力形成的影響。攪拌式植物細胞培育罐的細胞密度可達2×107 個/ml,并且出產縮小工藝絕對簡略,懸浮細胞培育較易縮小到萬升范圍以上。Lonza公司具有8臺20000L的攪拌式植物細胞培育罐,接納全懸浮培育手藝出產抗體;Baxter公司在2008 年報道,操縱8 周時候使Vero細胞微載體培育范圍從1ml縮小到6000L的范圍;美國Genentech 公司操縱12000L攪拌式植物細胞培育罐培育CHO細胞,出產t-PA重組卵白和醫治癌癥的生物藥物。產業操縱細胞培育罐罐體凡是由不銹鋼建造,根據耐壓容器請求停止設想。罐體頂端或底部裝配馬達,驅動槳葉停止攪拌,動員液體介質(培育液)的活動,完成夾雜和傳質結果;罐體頂端或正面裝配的在線傳感器(pH、溫度、溶氧等),與節制器相聯,可以或許延續測定罐體培育液的培育參數;細胞培育罐主動化水平越高,響應裝備的傳感器數目也越多;在全部培育進程中,依托各類差別的傳感器,細胞培育罐可以或許在線(on line)延續監測和調劑與細胞發展、分解、增殖、凋亡有關的參數,使它們一直堅持最好組合;正面裝配有取樣閥,便于取樣;頂部具有燈鏡和視鏡,用于培育罐內部察看;罐體底部裝配罐底隔閡閥,用于料液排放。罐體的設想還應利于在線潔凈和滅菌,防止死角的呈現。
細胞培育罐的支架管路,是培育罐供給氣(汽)體、液體的通道,經由進程各類閥門停止管路的開啟和封閉節制。經由進程電加熱、增壓泵、爬動泵、氣體過濾器、氣體流量計、氣體比例調理閥等裝配的檢測、運轉,堅持反映器運轉進程中的參數不變。培育罐的節制器,用以收羅培育罐運轉時的各類狀況參數,并停止主動或手動節制。
攪拌式植物細胞培育罐的根基功能
植物細胞培育的前提請求龐雜,為取得更好的細胞培育結果,常常裝備各類配件或儀器,以完成培育罐功能。細胞培育罐凡是具有以下根基功能:
1) 攪拌節制功能。經由進程馬達動員攪拌槳葉攪拌,完成液體的平均夾雜,動員細胞或載體的懸浮,并具有較低的剪切力,下降對細胞的毀傷。細胞培育罐攪拌體系可分為磁力攪拌和機器密封攪拌兩種情勢。前者接納進步前輩的磁力攪拌器裝配,使培育罐體系完整與外界隔斷,具有杰出的體系密封性,保障了反映器永劫候無菌運轉寧靜性;后者接納改進的機器密封手藝和怪異的操縱體例,防止了傳統的機器密封泄漏、倒霉于永劫候無菌運轉的弊病。
2) 溫度節制功能。植物細胞培育罐接納夾套輪回水停止溫度節制,操縱蒸汽或電加熱器停止加熱,注入冷卻水停止降溫。操縱蒸汽加熱能敏捷進步培育罐溫度,操縱電加熱器進步了培育罐溫度節制的活絡性和不變性。
3) pH節制功能。操縱pH電極停止檢測,由節制法式PID主動節制酸堿液的插手,完成pH節制。
4) 溶氧節制功能。操縱溶氧電極停止檢測,由節制法式PID主動節制氣體的插手,完成溶氧的節制。
5) 液位節制功能。操縱培育罐停止灌流培育時,為堅持培育體積的恒定,可操縱液位電極或稱重模塊來完成節制。
6) 細胞扣留功能。操縱培育罐停止灌流培育時,操縱扭轉過濾器將細胞扣留在反映器以內,可進步細胞培育密度。
7) 蒸汽滅菌功能。植物細胞培育罐具有手動滅菌和主動滅菌兩種體例,可以或許不變完成在線蒸汽滅菌功能。
8) PID 軟件節制功能。植物細胞培育罐接納觸摸屏節制和計較機終端長途節制兩種形式,具有數據顯現、工藝狀況顯現, 工藝參數節制、校訂,數據記實存儲、汗青數據查問等功能,合適GMP 辦理對成品的記實和可追溯性請求。 裝備有計較機終端長途節制功能,操縱職員經由進程終端機便可完成對反映器的操縱和監控。
植物細胞培育用攪拌式植物細胞培育罐還具有以下特色:
管路規劃公道、簡練,有用消弭管路滅菌死角,并完成了管路在線滅菌功能。滅菌操縱簡略便利,滅菌結果靠得住,為反映器無菌節制供給了有用保障。
深層通氣體系接納微泡產生器,負氣泡更小、更平均,溶氧通報結果杰出。
支架管路體系經由進程優化設想,削減氣體操縱的品種,操縱便利。
電極、儀表、節制器、閥門等主要裝備和元器件,均選用品德杰出的入口裝備,充實保障了反映器操縱靠得住性和運轉不變性。
攪拌式植物細胞培育罐是最典范、最早被接納的一種細胞培育罐。在諸多細胞培育罐范例中,該種培育罐最能表現植物細胞培育罐的設想理念,它凡是由罐體、管路、閥門、泵及馬達構成,由馬達動員槳葉夾雜培育液,經由進程攪拌器的感化使細胞和營養在培育液中平均散布;罐體上裝配的差別傳感器,用以在線延續檢測培育液的pH、溫度、溶氧等主要參數;小罐體凡是接納硼硅酸鹽玻璃建造,用于嘗試室范圍操縱;大罐體接納不銹鋼材質,用于大范圍出產。今朝,FDA核準的支流出產工藝是攪拌式植物細胞培育罐流加培育工藝,也是以后植物細胞大范圍培育的支流。緣由在于:攪拌式植物細胞培育罐既可用于懸浮細胞培育,也合用于微載體貼壁細胞培育,培育工藝輕易縮小,可以或許為細胞的發展和增殖供給均質的情況;產物品德不變,很是合適于工場化出產生物成品。固然攪拌所產生的剪切力對細胞無害,可是經由進程轉變槳葉的外形和尺寸,或是在培育基中增添一些血清、牛血潔白卵白、葡聚糖及非離子外表活性劑Pluronic F68 等,可下降剪切力形成的影響。攪拌式植物細胞培育罐的細胞密度可達2×107 個/ml,并且出產縮小工藝絕對簡略,懸浮細胞培育較易縮小到萬升范圍以上。Lonza公司具有8臺20000L的攪拌式植物細胞培育罐,接納全懸浮培育手藝出產抗體;Baxter公司在2008 年報道,操縱8 周時候使Vero細胞微載體培育范圍從1ml縮小到6000L的范圍;美國Genentech 公司操縱12000L攪拌式植物細胞培育罐培育CHO細胞,出產t-PA重組卵白和醫治癌癥的生物藥物。產業操縱細胞培育罐罐體凡是由不銹鋼建造,根據耐壓容器請求停止設想。罐體頂端或底部裝配馬達,驅動槳葉停止攪拌,動員液體介質(培育液)的活動,完成夾雜和傳質結果;罐體頂端或正面裝配的在線傳感器(pH、溫度、溶氧等),與節制器相聯,可以或許延續測定罐體培育液的培育參數;細胞培育罐主動化水平越高,響應裝備的傳感器數目也越多;在全部培育進程中,依托各類差別的傳感器,細胞培育罐可以或許在線(on line)延續監測和調劑與細胞發展、分解、增殖、凋亡有關的參數,使它們一直堅持最好組合;正面裝配有取樣閥,便于取樣;頂部具有燈鏡和視鏡,用于培育罐內部察看;罐體底部裝配罐底隔閡閥,用于料液排放。罐體的設想還應利于在線潔凈和滅菌,防止死角的呈現。
細胞培育罐的支架管路,是培育罐供給氣(汽)體、液體的通道,經由進程各類閥門停止管路的開啟和封閉節制。經由進程電加熱、增壓泵、爬動泵、氣體過濾器、氣體流量計、氣體比例調理閥等裝配的檢測、運轉,堅持反映器運轉進程中的參數不變。培育罐的節制器,用以收羅培育罐運轉時的各類狀況參數,并停止主動或手動節制。
攪拌式植物細胞培育罐的根基功能
植物細胞培育的前提請求龐雜,為取得更好的細胞培育結果,常常裝備各類配件或儀器,以完成培育罐功能。細胞培育罐凡是具有以下根基功能:
1) 攪拌節制功能。經由進程馬達動員攪拌槳葉攪拌,完成液體的平均夾雜,動員細胞或載體的懸浮,并具有較低的剪切力,下降對細胞的毀傷。細胞培育罐攪拌體系可分為磁力攪拌和機器密封攪拌兩種情勢。前者接納進步前輩的磁力攪拌器裝配,使培育罐體系完整與外界隔斷,具有杰出的體系密封性,保障了反映器永劫候無菌運轉寧靜性;后者接納改進的機器密封手藝和怪異的操縱體例,防止了傳統的機器密封泄漏、倒霉于永劫候無菌運轉的弊病。
2) 溫度節制功能。植物細胞培育罐接納夾套輪回水停止溫度節制,操縱蒸汽或電加熱器停止加熱,注入冷卻水停止降溫。操縱蒸汽加熱能敏捷進步培育罐溫度,操縱電加熱器進步了培育罐溫度節制的活絡性和不變性。
3) pH節制功能。操縱pH電極停止檢測,由節制法式PID主動節制酸堿液的插手,完成pH節制。
4) 溶氧節制功能。操縱溶氧電極停止檢測,由節制法式PID主動節制氣體的插手,完成溶氧的節制。
5) 液位節制功能。操縱培育罐停止灌流培育時,為堅持培育體積的恒定,可操縱液位電極或稱重模塊來完成節制。
6) 細胞扣留功能。操縱培育罐停止灌流培育時,操縱扭轉過濾器將細胞扣留在反映器以內,可進步細胞培育密度。
7) 蒸汽滅菌功能。植物細胞培育罐具有手動滅菌和主動滅菌兩種體例,可以或許不變完成在線蒸汽滅菌功能。
8) PID 軟件節制功能。植物細胞培育罐接納觸摸屏節制和計較機終端長途節制兩種形式,具有數據顯現、工藝狀況顯現, 工藝參數節制、校訂,數據記實存儲、汗青數據查問等功能,合適GMP 辦理對成品的記實和可追溯性請求。 裝備有計較機終端長途節制功能,操縱職員經由進程終端機便可完成對反映器的操縱和監控。
植物細胞培育用攪拌式植物細胞培育罐還具有以下特色:
管路規劃公道、簡練,有用消弭管路滅菌死角,并完成了管路在線滅菌功能。滅菌操縱簡略便利,滅菌結果靠得住,為反映器無菌節制供給了有用保障。
深層通氣體系接納微泡產生器,負氣泡更小、更平均,溶氧通報結果杰出。
支架管路體系經由進程優化設想,削減氣體操縱的品種,操縱便利。
電極、儀表、節制器、閥門等主要裝備和元器件,均選用品德杰出的入口裝備,充實保障了反映器操縱靠得住性和運轉不變性。
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